EJERCICIO 1. PRÁCTICA LAB-CLINIC

ACTIVIDAD EXPERIMENTAL No. 1

ASIGNATURA: PROCESAR TÉCNICAS PARA EL DIAGNÓSTICO CLÍNICO.

PROPÓSITO.- Comprender y Realizar la preparación de medios de cultivo basándose en sus conocimientos sobre la esterilización y características de los microorganismos.

GENERALIDADES.- Es el material alimenticio en el que crecen los microorganismos, siendo este uno de los sistemas más importantes para el aislamiento e identificación de los microorganismo.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo (M.C.B), este deberá reunir una serie de condiciones como lo son: Temperatura, Humedad, oxígeno, y un Ph adecuado. Además de los nutrientes y factores de crecimiento necesario para un buen desarrollo bacteriano.

Existen medios que se le añaden diferentes materiales de enriquecimiento (azucares, sueros, sangre, bilis) o bien sustancias que los vuelven selectivos porque actúan como inhibidores del crecimiento de unas bacterias también se añaden colorantes que actúan como indicadores para identificar cierto tipo de bacterias.

MATERIAL		REACTIVOS
Matraz elenmeyer de 250 ml.		Medios de EBM.
Autoclave		Medio de agar cetritrinina
Algodón		Agar nutritivo
Gasa		Sangre
Balanza		Agua destilada
Mechero		Glicerina
Tipie
Malla con asbesto
Caja de Petri estériles desechables

PROCEDIMIENTO

GENERALIDADES.- Es un medio de cultivo para el aislamiento de bacilos entéricos gram negativos.

El uso de eosina y azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras.

PREPARACIÓN.- Suspender 36 gr de medio litro de agua purificada y calentar con agitación suave hasta completar disolución y hervir durante un minuto.

Esterilizar en autoclave a 121 °c  (15 liras de presión), durante 15 minutos. Dejar enfriar a temperatura entre 45 y 50 °c y luego se vacía en las cajas de Petri.

AGAR SANGRE.

GENERALIDADES: Es un medio enriquecido que se utiliza a demás para la investigación de los diversos tipos de hemolisis (alfa, beta y gama) Se utiliza para el crecimiento de estreptococos.

Para su preparación se utiliza un agar base que puede ser (agar nutritivo, agar Columbia o agar tripticase de soya). Adicionándole 5ml de sangre por cada 100ml de medio (5%).

PREPARACIÓN.- Suspender 40g de agar base en un litro de agua purificada mezclar perfectamente, calentar con agitación frecuente y hervir por un minuto hasta disolución completa esterilizar a 121°c por 15 min  luego enfriar a 45 -50 °c y adicionar 5% de sangre estéril desfibrinada.

AGAR CETRIMIDA ( Agar King)

GENERALIDADES.- Medio de cultivo selectivo para el aislamiento de pseudomonas aeruginosas, la cetrimida ( Bromuro de cetiltrimetilamonio) que inhibe el crecimiento de las bacterias debido a su acción como un compuesto cuaternario de amonio.

PREPARACIÓN.- Rehidratar 43 gr de medio en un litro de agua destilada, luego agregar 10ml de glicerol, reposar de 10 a 15 min , paso seguido calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121°c ( 15 libras de presión) durante 15 minutos. Y por último se deja enfriar aproximadamente a 45°c , vaciar en las cajas de Petri estériles.

EJERCICIO.- La evidencia de aprendizaje de este tema correspondiente a la actividad experimental número 1. Elige la opción deseada a desarrollar: Puedes hacer un mapa conceptual o desarrollar las siguientes interrogantes (cuestionario).   Al final enviar al docente al email… doctorcito.25@hotmail.com

1.- ¿Que es un medio de cultivo?

2.- ¿Cómo se clasifican los medios de cultivo?

3.- Después de preparado el medio de cultivo, ¿Qué parámetros de calidad debe monitorear?

4.- Menciona tres medios de cultivo uno de cada clasificación.

5.- ¿Qué condiciones debe reunir un medio de cultivo?

6.-¿Menciona el proceso paso a paso, para preparar Agar sangre?

7.- Enviar a  profesamaniego@gmail.com